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10.19378/j.issn.1003-9783.2022.07.004

鱼藤素联合喜树碱对宫颈癌细胞自噬、凋亡及PI3K/Akt通路的影响

引用
目的 探讨鱼藤素联合喜树碱对宫颈癌HeLa细胞自噬、凋亡及PI3K/Akt通路的影响.方法 以不同浓度鱼藤素(0、10、100、500、1 000 nmol·L-1)、喜树碱(0、1、5、10、50μmol·L-1)及联合干预处理HeLa细胞48h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况.将细胞分为对照组、鱼藤素组(100nmol·L-1)、喜树碱组(5 μmol·L-1)、联合干预组(100 nmol·L-1鱼藤素+5 μmol·L-1喜树碱)、联合干预+LY294002组(100 nmol·L-1鱼藤素+5 μmol·L-1喜树碱+5 μg·mL-1 PI3K特异性抑制剂LY294002),分别进行相应干预48 h.采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡情况;采用透射电镜观察HeLa细胞自噬小体;Western Blot法检测HeLa细胞中凋亡、自噬及PI3K/Akt通路相关蛋白的表达.构建HeLa移植瘤裸鼠模型,分为对照组、鱼藤素组(10 mg·kg-1)、喜树碱组(6 mg·kg-1)、联合干预组(10 mg·kg-1鱼藤素+6 mg·kg-1喜树碱)及联合干预+LY294002组(10 mg·kg-1鱼藤素+6 mg·kg-1喜树碱+6mg·kg-1LY294002),连续干预21d后检测肿瘤质量并计算抑瘤率.结果 HeLa细胞增殖抑制率随鱼藤素和喜树碱浓度的增加而明显增加(P<0.05),联合干预组的细胞增殖抑制率明显高于鱼藤素、喜树碱单独处理组.与对照组相比,鱼藤素组、喜树碱组的HeLa细胞凋亡率明显升高(P<0.05),自噬小体数量明显增加(P<0.05),Caspase-3、Bax、Beclin1、LC31I/LC3I 蛋白表达明显上调(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt 蛋白表达明显下调(P<0.05),HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低(P<0.05),抑瘤率明显升高.分别与鱼藤素组或喜树碱组相比,联合干预组的HeLa细胞凋亡率明显升高(P<0.05),自噬小体数量明显增加(P<0.05),Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3II/LC3I 蛋白表达明显上调(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt 蛋白表达明显下调(P<0.05),HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低(P<0.05),抑瘤率明显升高.与联合干预组相比,联合干预+LY294002组的HeLa细胞凋亡率明显升高(P<0.05),自噬小体数量明显增加(P<0.05),Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3II/LC3I 蛋白表达明显上调(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt 蛋白表达明显下调(P<0.05),HeLa移植瘤裸鼠肿瘤质量明显降低(P<0.05),抑瘤率明显升高.结论 鱼藤素联合喜树碱可能通过抑制PI3K/Akt通路促进HeLa细胞自噬和凋亡,并抑制肿瘤生长.

HeLa细胞、鱼藤素、喜树碱、联合用药、凋亡、自噬、PI3K/Akt通路

33

R285.5(中药学)

江苏省高校自然科学研究面上项目17KJB360002

2022-09-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

882-888

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1003-9783

44-1308/R

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2022,33(7)

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