基于miRNA微阵列探讨补阳还五汤对脑缺血大鼠神经血管单元的保护机制

摘要：

目的 观察补阳还五汤对脑缺血大鼠微小RNA(miRNA)表达谱的影响,探讨其对脑缺血后神经血管单元(NVU)的保护机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、补阳还五汤组(5 g·kg-1)及丁苯酞组(54 mg·kg-1),灌胃给药.除对照组外,其余各组采用大脑中动脉栓塞法复制脑缺血模型.灌胃给药7 d后,采用神经行为学评分评估神经功能损伤,HE染色评估病理损伤,免疫组化法检测脑组织中神经血管单元相关蛋白微管相关蛋白2(MAP2)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和血管性血友病因子(VWF)的表达,miRNA微阵列筛选差异表达的miRNAs,通过基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析差异miRNAs靶基因参与的主要生物学过程,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法验证微阵列芯片结果.结果 与对照组比较,模型组大鼠神经行为学评分明显升高(P＜0.01);缺血侧神经元排列不规整,细胞间隙增宽,细胞核固缩;缺血侧脑组织中MAP2及VWF的表达降低(P＜0.01),GFAP表达上升(P＜0.01);共有82个差异表达的miRNAs(FC≥1.5且P＜0.05).与模型组比较,补阳还五汤组大鼠神经行为学评分降低(P＜0.01);缺血侧神经元排列相对规整,细胞间隙减小,核仁较清晰;缺血侧脑组织MAP2及VWF的表达上升(P＜0.01),GFAP表达下降(P＜0.01);并有9个差异表达的miRNAs(FC≥1.5且P＜0.05).生物信息学分析显示核心miRNAs可能主要通过IL-17信号通路、趋化因子信号通路及Hippo信号通路等发挥治疗作用.与对照组比较,qRT-PCR 检测发现模型组中 rno-miR-532-5p、rno-miR-338-3p 及 rno-miR-412-5p 表达下调(P＜0.01,P＜0.05),rno-miR-211-3p及rno-miR-494-3p表达上调(P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,补阳还五汤组rno-miR-532-5p、rno-miR-338-3p 及 rno-miR-412-5p 表达上调(P＜0.01,P＜0.05),rno-miR-211-3p 及rno-miR-494-3p表达下调(P＜0.01),与微阵列芯片结果趋势一致.结论 补阳还五汤可能通过影响脑缺血大鼠的miRNA表达谱,保护神经血管单元,发挥抗脑缺血损伤的作用.

关键词：补阳还五汤、脑缺血、微小RNA(miRNA)、微阵列、神经血管单元(NVU)、大鼠

所属期刊栏目：33

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南中医药大学中医学一流学科开放基金项目;湖南中医药大学研究生创新课题

在线出版日期：2022-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：333-341