藤黄可乐化学成分及其抗氧化活性研究

摘要：

目的 研究藤黄可乐种子的化学成分及其抗氧化活性.方法 采用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱以及高效液相色谱(HPLC)等多种手段对藤黄可乐种子乙酸乙酯萃取相进行分离纯化,并根据波谱数据及理化性质鉴定化合物结构.采用2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)法和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法对所得化合物进行抗氧化活性测试.采用分子对接方法预测C1化合物(Garcinianin)与核因子E2相关因子2(NRF2)的相互结合能力.以终浓度为0、0.78、1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol·L-1的Garcinianin对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)细胞进行干预,以CCK8法检测THP-1细胞活力.采用脂多糖(LPS,1μg·mL-1)诱导THP-1细胞,并以25、50、100μmol·L-1 Garcinianin进行干预;采用ELISA法测定THP-1细胞谷胱甘肽(GSH)含量;qRT-PCR法检测NRF2、血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达;Western Blot法检测NRF2蛋白表达;DCFH-DA荧光探针法测定活性氧(ROS)的含量.结果 从乙酸乙酯萃取相分离得到6个单体化合物,分别为C1(Garcinianin)、C2(Kolaflavanone)、C3(GB1a)、C4(GB2)、C5(Panciflavanon)、C6(山奈酚).DPPH法测定不同化合物抗氧化活性强弱为C1>C5>C4>C6>C2>C3,ABTS法测定不同化合物抗氧化活性强弱为C1>C5>C3>C6>C2>C4,后续选择抗氧化活性最佳的C1化合物(Garcinianin)进行相关实验.Garcinianin与NRF2分子对接显示二者亲密结合.Garcinianin浓度≤100μmol·L-1时,无明显细胞毒性.与空白组比较,LPS组的THP-1细胞NRF2、HO-1 mRNA表达及NRF2蛋白表达明显下调(P<0.05),细胞上清液中GSH含量显著降低(P<0.01),ROS含量明显升高;与LPS组比较,Garcinianin各浓度组的THP-1细胞NRF2、HO-1 mRNA表达及NRF2蛋白表达均明显上调(P<0.05),细胞上清液中GSH含量显著升高(P<0.01),ROS含量降低.结论 藤黄可乐中的6个化合物都具有不同程度的抗氧化作用,Garcinianin可能是通过调节NRF2信号通路,降低氧化应激来保护LPS诱导的THP-1细胞损伤.

关键词：藤黄可乐、化学成分、结构鉴定、抗氧化活性、Garcinianin、THP-1细胞、NRF2信号通路

所属期刊栏目：31

分类号：R284.1;R285.5(中药学)

资助基金：广东省科技厅扬帆计划;广东省中医药局科研项目;广州市科技计划;重大新药创制"科技重大专项

在线出版日期：2020-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1133-1140