10.19378/j.issn.1003-9783.2020.07.007
柚皮素对阿霉素致心肌细胞损伤的保护作用及机制研究
目的 探讨柚皮素(Naringenin,NAR)对阿霉素(Adriamycin,ADR)导致的心肌细胞损伤的保护作用及其机制.方法 采用0.25、0.5、1.0、1.5μmol·L-1阿霉素作用于大鼠H9c2心肌细胞24、48、72、96 h,筛选阿霉素诱导心肌细胞损伤模型的浓度及时间;采用1.5、3.0、6.0、12.5、25、50、100、200μmol·L-1柚皮素预处理24 h后,再加入1.0μmol·L-1的阿霉素共同作用48 h,观察柚皮素对阿霉素诱导H9c2心肌细胞损伤模型的干预作用;分别以3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol·L-1柚皮素干预H9c2心肌细胞72 h,筛选出无细胞毒性的柚皮素浓度.将H9c2心肌细胞分为阿霉素组(模型组,1μmol·L-1)、对照组(空白对照)、阿霉素(1μmol·L-1)+柚皮素(12.5μmol·L-1)组,柚皮素预处理H9c2细胞24 h后,再加入1μmol·L-1阿霉素共同作用48 h.采用MTT法测定心肌细胞存活率;微量酶标法测定心肌细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量;WST-8法测定心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)酶活性;ROS荧光探针-DHE检测心肌细胞活性氧含量;Western Blot法检测定心肌细胞cleaved-Caspase3、Bcl-2、Bax蛋白表达水平.结果 选择1μmol·L-1阿霉素作用48 h建立H9c2心肌细胞损伤模型.浓度为12.5μmol·L-1的柚皮素抗阿霉素损伤作用最强.选择对H9c2细胞活力没有影响的12.5μmol·L-1柚皮素用于后续实验.与对照组比较,阿霉素组心肌细胞内的GSH的含量及SOD酶活力明显降低(P<0.05),活性氧的含量明显升高,cleaved-Caspase3蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01).与阿霉素组比较,阿霉素+柚皮素组心肌细胞内的GSH含量及SOD酶活力明显升高(P<0.05),活性氧的含量明显降低,cleaved-Caspase3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.05).结论 柚皮素对阿霉素诱导的H9c2心肌细胞损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化应激、抑制细胞凋亡有关.
柚皮素、阿霉素、H9c2心肌细胞、心肌细胞损伤、细胞凋亡、抗氧化作用
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R285.5(中药学)
湖北省卫生健康委科研项目;地方高校国家级大学生创新创业训练计划项目;湖北科技学院药学重点专项科研项目;湖北科技学院糖尿病专项课题
2020-07-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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