逍遥散含药血清影响RIN-m5f细胞活性及胰岛素分泌的机制探讨

摘要：

目的 研究逍遥散合药血清对应激损伤状态糖尿病细胞模型[大鼠胰岛β细胞瘤细胞(RIN-m5f)]的活性、胰岛素(INS)分泌的影响及其干预机制.方法 用高浓度葡萄糖(50 mmol·L-1)和皮质酮(CORT,320 μmol·L-1)诱导培养RIN-m5f细胞12 h,制备应激损伤状态糖尿病细胞模型,再用30％逍遥散含药血清干预,并设立空白血清对照.共分为7组:①正常组:RIPM1640+10％FBS;②高糖组(G组):①+50 mmol·L-1的葡萄糖;③应激组(GCo组):②+320 μmol·L-1的CORT;④空白血清高糖组(GC组):②+30％空白组大鼠血清(30％C)⑤逍遥散血清高糖组(GX组):②+30％逍遥散组大鼠血清(30％X);⑥空白血清应激组(GCoC组):③+30％C;⑦逍遥散血清应激组(GCoX组):③+30％X.干预12h后,采用CCK-8法检测细胞活性;酶联免疫法(ELISA)检测细胞INS分泌水平;实时荧光定量PCR(qPCR)法检测细胞活化转录因子6(ATF-6)、肌醇需酶1(IRE-1)mRNA表达;Western Blot法检测细胞Caspase-12、CHOP蛋白表达.结果 与正常组比较,G组细胞活性和ATF6、IRE1 mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平显著下降(P＜0.05,P＜0.01),INS水平显著升高(P＜0.01).与G组比较,GCo组细胞活性显著降低(P＜0.01),INS水平和ATF6、IRE1 mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平均明显上调(P＜0.05,P＜0.01).与GC组比较,GX组的细胞活性明显升高(P＜0.05),ATF6、IRE1 mRNA以及Caspase-12蛋白表达水平均明显上调(P＜0.05,P＜0.01),但INS水平、CHOP蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与GCoC组比较,GCoX组的细胞活性、INS水平明显升高(P＜0.05),IRE1 mRNA以及Caspase-12、CHOP蛋白表达水平明显下降(P＜0.05,P＜0.01),但ATF6mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高浓度葡萄糖和CORT能降低应激损伤状态糖尿病RIN-m5f细胞的活性,升高INS水平,加重胰岛素抵抗(IR)程度.逍遥散含药血清能缓解细胞IR水平,其作用机制可能与调控内质网应激(ERS)相关.

关键词：逍遥散、含药血清、糖尿病、大鼠胰岛β细胞瘤细胞、慢性应激、胰岛素分泌、内质网应激

所属期刊栏目：30

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2019-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：647-652