天麻钩藤饮对A7r5细胞时钟基因昼夜节律的影响及机制探讨

摘要：

目的 观察天麻钩藤饮对AngⅡ诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞A7r5中时钟基因(Per2、Bmal1、Clock)、AT1R基因及Src、p-Src蛋白昼夜节律表达的影响,探讨天麻钩藤饮通过AT1R信号途径调节时钟基因昼夜节律变化的可能机制.方法 以AngⅡ诱导A7r5细胞建立时钟基因昼夜节律变化模型,将细胞模型分为AngⅡ诱导组、天麻钩藤饮组.AngⅡ诱导组以终浓度为100 nmol·L-1的AngⅡ诱导24 h,天麻钩藤饮组以终浓度为100 nmol·L-1的AngⅡ和200 mg·L-1的天麻钩藤饮处理24 h,以加样时间为ZT0,每隔4小时收集细胞,提取蛋白和RNA,采用Q-PCR方法检测各时间点A7r5细胞中的时钟基因(Per2、Bmal1、Clock)和AT1R基因表达水平,Western Blot检测各时间点A7r5细胞中Src、p-Src蛋白表达水平.结果 AngⅡ作用于A7r5细胞后,时钟基因Bmal1和Per2表达中值升高,峰相位前移,呈现出与正常细胞不同的昼低夜高的反杓型节律变化;AT1R基因表达水平显著升高、Src、p-Src蛋白表达亦呈现出昼低夜高的反杓型节律变化;与AngⅡ诱导组相比,天麻钩藤饮组A7r5细胞Bmal1、Per2基因mRNA表达中值降低,呈现昼高夜低的杓型节律变化,AT1R基因及Src、p-Src蛋白的表达水平下降,呈现类似空白对照组的昼夜节律变化.结论 天麻钩藤饮能够通过AT1R信号通路调节AngⅡ诱导的A7r5细胞时钟基因昼夜节律改变.

关键词：天麻钩藤饮、时钟基因、AT1R信号通路、昼夜节律

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;广东省自然科学基金;广州中医药大学青年英才项目;广州中医药大学高水平建设项目;广州中医药大学高水平建设项目;广州市中医药防治脑病研究重点实验室资助项目

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：307-312