10.19378/j.issn.1003-9783.2016.05.006
天龙咳喘灵提取物对A549细胞上皮间质转化的影响及机制研究
目的:探讨天龙咳喘灵提取物能否抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的A549细胞上皮-间质转化(EMT)及其作用机制。方法1.用TGF-β1刺激体外培养的A549细胞发生EMT,观察天龙咳喘灵提取物干预后细胞形态的改变, Real-time PCR和Western blot检测上皮标志E-cadherin和间质标志Fibronectin的表达情况。2.检测不同时间点TGF-β1和天龙咳喘灵提取物对Notch1、 Jagged1和Hey1表达的影响。3.转染Jagged1 siRNA并用TGF-β1刺激细胞,检测E-cadherin和Fibronectin的蛋白表达情况。结果1.与空白对照组比较, TGF-β1组细胞发生间质细胞形态变化, E-cadherin的mRNA和蛋白表达下调, Fibronectin表达上调;与TGF-β1组相比,天龙咳喘灵提取物组细胞恢复上皮细胞形态, E-cadherin 的 mRNA 和蛋白表达上调, Fibronectin表达下调。2. TGF-β1刺激后, Jagged1、 Hey1的表达量随着时间上调,而Notch1表达量无明显变化;天龙咳喘灵提取物可使Notch1、 Jagged1、 Hey1的表达量均随着时间下调。3.转染Jagged1 siRNA成功敲除Jagged1基因后, TGF-β1诱导的E-cadherin表达下调和Fibronectin表达上调受到抑制。结论天龙咳喘灵提取物通过下调Notch信号通路抑制TGF-β1诱导的上皮间质转化。
天龙咳喘灵、上皮-间质转化、Notch信号通路、转化生长因子-β1
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R285.5(中药学)
广东省科技计划2013A032500015
2016-10-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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