补阳还五汤通过调节HUVEC细胞Rho/Rho激酶信号通路作用于动脉粥样硬化的研究

摘要：

目的 研究补阳还五汤抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的作用及其机制.方法 采用Hcy造模,将内皮细胞随机分为10组,即空白组(10％空白血清),模型组(Hcy+10％空白血清),补阳还五汤低剂量组(5％含药血清+ Hcy)、中剂量组(10％含药血清+Hcy)、高剂量组(20％含药血清+Hcy),10％FBS+Hcy对照组,Rho激酶(ROCK)阻断剂Y27632 +Hcy组,靶分子肌球蛋白轻链激酶(MLCK)阻断剂ML-7+Hcy组,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580+Hcy组,细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059+Hcy组,24 h后,用IP裂解液(含PMSF)裂解细胞.用蛋白质印迹法(Western blot)测定ROCK、MLCK蛋白水平,用RT-PCR技术测定ROCK、MLCK mRNA的表达情况,并用激光共聚焦测定细胞骨架结构蛋白纤维肌动蛋白(F-actin)的变化.结果 Western blot与RT-PCR结果显示:模型组与空白组比较,HUVEC细胞ROCK、MLCK蛋白以及其mRNA水平明显上升,而补阳还五汤含药血清组和抑制剂组对其有明显的下调作用.激光共聚焦检测骨架蛋白F-actin实验中,与空白组比较,模型组细胞应力纤维明显增多;而补阳还五汤各剂量组相对于模型组,应力纤维的形成明显降低.结论 补阳还五汤可能通过调节内皮细胞Rho/Rho激酶信号通路,阻止细胞骨架的改变,减轻内皮细胞损伤而发挥其抗动脉粥样硬化的作用.

关键词：补阳还五汤、Rho/Rho激酶信号通路、细胞骨架、动脉粥样硬化、同型半胱氨酸

所属期刊栏目：26

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;江西省卫生厅项目

在线出版日期：2015-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：595-600