小鼠肝脏自然杀伤细胞分离纯化及受体表达分析

摘要：

目的:立一种有效分离纯化小鼠肝脏自然杀伤细胞(NK细胞)的方法,对其表面几种NK细胞受体(NKP46、NKG2D、NKG2A/C/E和Ly49A/C/I)的表达进行分析.方法:先利用Percoll不连续密度梯度离心分离小鼠肝脏淋巴细胞,一步经CD5(Ly-1)磁珠阳性分选清除CD3+DX5+T细胞,后利用CD49b(DX5)磁珠阳性分选肝脏NK(CD3-DX5+)细胞.分离后的细胞经台盼蓝染色检测细胞存活率,式细胞术检测肝脏NK细胞纯度及几种NK细胞受体的表达百分率.结果:连续密度梯度离心能有效分离出肝脏淋巴细胞,D5(Ly-1)磁珠清除CD3+DX5+T细胞后再用CD49b(DX5)磁珠阳性分选出肝脏NK(CD3-DX5+)细胞,度可达到(94.8±1.0)%,活率为92%~95%.NK细胞受体NKP46、NKG2D、NKG2A/C/E和Ly49A/C/I在小鼠肝脏NK细胞上的表达百分率分别为(97.9±0.7)%、(93.2±1.7)%、(57.2±0.9)%和(63.3±1.9)%.结论:功建立了一种有效分离纯化小鼠肝脏NK细胞的方法,握了正常小鼠肝脏NK细胞上几种重要受体的表达情况,进一步在病毒性肝炎小鼠模型中进行肝脏NK细胞功能学研究及受体基因芯片分析奠定了基础.

关键词：自然杀伤细胞、受体、密度梯度离心、免疫磁珠分选

所属期刊栏目：18

分类号：R73;X17

资助基金：73计划重要传染病基础研究专项2007CB512900,2005CB522901;国家自然科学基金面上项目NSFC30672380,0571643

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：277-279