10.3969/j.issn.1005-0264.2004.06.009
人肝再生增强因子上调硫氧还蛋白还原酶1基因表达的研究
目的:探讨人肝再生增强因子(hALR)对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.方法:以我室构建的hALR的cDNA基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定TXNRD1的启动子区域(TXNRD1p),聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRD1p,亚克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-TXN-RD1p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与表达载体pcDNA3.1(-)-ALR共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果:pCAT3-TXNRD1p和pcDNA3.1(-)-ALR瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的10.4倍,pcAT3-TXNRD1p的2.1倍.本实验进一步验证了我室利用基因表达谱技术研究ALR蛋白反式激活作用的结果.结论:我室克隆的TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性;hALR蛋白具有对TXNRD1的反式激活作用.
肝再生增强因子、启动子、反式激活
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R39;R57
国家自然科学基金C03011402,C30070689;军队科技攻关项目98D063;军队杰出人才基金98H038;军队科技攻关青年基金01Q138;军队科技攻关项目01MB135
2005-11-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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