补骨脂对骨关节炎软骨细胞模型基质金属蛋白酶及核因子-κB表达的影响
目的 探索补骨脂对骨关节炎(OA)软骨细胞模型基质金属蛋白酶(MMPs)与核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 通过细胞增殖实验确定补骨脂干预细胞的高、中、低剂量分别为3600、1800、900mg/L.将细胞分为正常组、模型组(10 ng/mL IL-1β)、补骨脂低剂量组(10 ng/mL IL-1β+900 mg/L补骨脂)、补骨脂中剂量组(10 ng/mL IL-1β+1800 mg/L补骨脂)、补骨脂高剂量组(10 ng/mL IL-1β+3600 mg/L补骨脂).采用10 ng/mL IL-1β诱导人软骨肉瘤细胞(SW1353)炎症反应,构建OA软骨细胞模型.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测MMP-1、MMP-3、MMP-13、NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)蛋白表达,及免疫荧光观察NF-κB p65蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组细胞内MMP-1、MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达增加,胞核内NF-κB p65蛋白表达增加,胞浆中IκB-α蛋白表达减少(P<0.01).与模型组比较,补骨脂高剂量组细胞内MMP-3、MMP-13 mRNA及蛋白表达明显减少,胞核内NF-κB p65蛋白表达明显减少,胞浆中IκB-α蛋白表达显著增加(P<0.01).免疫荧光显示,高剂量补骨脂能部分抑制胞浆中NF-κB p65蛋白转移至胞核内.结论 补骨脂可通过抑制NF-κB通路,下调MMP-3、MMP-13表达,起到保护软骨的作用.
补骨脂;SW1353细胞;骨关节炎;核因子-κB;基质金属蛋白酶
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国家自然科学基金No.81804042
2022-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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