健脾祛湿和络方含药血清对足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR表达的影响
目的 探讨健脾祛湿和络方(Jianpi Qushi Heluo Formula,JQHF)含药血清对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的小鼠足细胞损伤模型标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及mTOR相关自噬因子表达的影响.方法 以体外培养小鼠足细胞为研究对象,除空白组外均以PAN(100 μ/mL)体外诱导足细胞,根据含药血清细胞培养基的不同分为空白组(10％空白血清),模型组(10％空白血清+PAN),JQHF低剂量组(10％低剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF中剂量组(10％中剂量JQHF含药血清+PAN),JQHF高剂量组(10％高剂量JQHF含药血清+PAN),替米沙坦(TMST)组(10％TMST含药血清+PAN),醋酸泼尼松(PRE)组(10％ PRE含药血清+PAN),雷帕霉素(RAP)组(100 μg/L RAP+10％空白组血清+PAN).CCK-8法检测足细胞损伤模型在各组血清作用后的活性变化;Western blot法检测各组足细胞标志蛋白Nephrin、Podocalyxin及细胞内mTOR相关自噬蛋白表达水平.结果 (1)与空白组比较,模型组细胞活力显著下降(P＜0.01),与模型组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组足细胞活力上升(P＜0.05);(2)与模型组比较,除JQHF低剂量组Podocalyxin表达外,其余各药物干预组Nephrin、Podoca-lyxin表达均增多(P＜0.05,P＜0.01);与JQHF低剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P＜0.05);与JQHF中剂量组比较,JQHF高剂量、TMST、PRE及RAP组Nephrin表达增多(P＜0.05),TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达亦增多(P＜0.05);与JQHF高剂量组比较,TMST、PRE、RAP组Podocalyxin表达增多(P＜0.05).(3)与模型组比较,各药物干预组LC3-Ⅱ表达均增多(P ＜0.05,P＜0.01),JQHF高剂量组、TMST组、PRE组、RAP组P-mTOR、P-4EBP1表达均减少(P＜0.05),JQHF高剂量组、TMST组、RAP组P-P70S6K表达减少(P＜0.01).结论 JQHF可以改善细胞内自噬水平,修复PAN诱导损伤足细胞,与上调细胞内Nephrin、Podocalyxin及LC3-Ⅱ的表达,减少mTOR及相关因子合成有关.
足细胞、健脾祛湿和络方、Nephrin蛋白、Podocalyxin蛋白、mTOR自噬相关因子
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R285.5;R692;R587.2
中国中医科学院自主选题研究项目No.5050109
2018-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1106-1111
