淫羊藿苷促前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的实验研究
目的 探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的机制.方法 采用不同浓度(10-10 ~10-5 mol/L)的ICA干预前成骨细胞MC3T3-E1 3、6、9天后采用碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性检测试剂盒测定ALP活性,确定ICA最适促分化浓度.最适ICA浓度干预前成骨细胞MC3T3-E1 7天后应用实时定量PCR法(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测骨形态发生蛋白(BMP)和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1)基因表达.ICA分别与BMP、Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(Noggin、DKK-1)联合干预前成骨细胞MC3T3-E1后,茜素红钙结节染色观察钙化程度以及Western blot检测BMP-2蛋白表达变化.结果 ICA促进前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化,且10-9mol/L ICA促进分化的能力最强.与对照组比较,ICA能明显上调BMP和Wnt/β-catenin信号通路相关分子(BMP-2、Runx2、β-catenin、cyclinD1) mRNA表达(P<0.01).Noggin或DKK-1能抑制前成骨细胞MC3T3-E1钙化,且两者联合作用时抑制更加明显.与ICA单独作用比较,ICA与DKK1联合干预后BMP-2蛋白表达水平下降(P<0.01).结论 ICA可能通过Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路调控前成骨细胞MC3T3-E1的成骨分化.
淫羊藿苷、前成骨细胞MC3T3-E1、成骨分化、Wnt/β-catenin/BMP-2信号通路
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R737.11;R285.5;R318
湖北省自然科学基金No.2016CFB676
2018-09-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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687-692