虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮A549细胞EMT的影响
目的 探讨虎杖苷对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人类肺泡上皮A549细胞生长及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的作用机制.方法 体外培养A549细胞,随机分成5组:空白组、对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别加入普通培养液、含5 ng/mL TGF-β1的培养液、含浓度为50 μmol/mL的虎杖苷加TGF-β1的培养液、含浓度为100 μmol/mL的虎杖苷加TGF-β1的培养液、含浓度为150 μmol/mL的虎杖苷加TGF-β1的培养液进行干预,观察并记录不同时间段细胞形态变化;MTT法检测虎杖苷最佳药物浓度;蛋白质印迹法(Western blot)、实时PCR(Real-time PCR)检测上皮标志物E-cad、间质标志物Vimentin蛋白及mRNA表达水平.结果 倒置相差显微镜观察到虎杖苷和TGF-β1干预后A549细胞由原来的鹅卵石状上皮形态转变成梭形,且细胞间隙变大,细胞间的连接变得松散,对照组较为明显,低、中、高剂量组比对照组细胞形态稍饱满;48 h中剂量组虎杖苷对TGF-β1诱导的A549细胞EMT抑制作用最明显.在虎杖苷和TGF-β1作用下,E-cad蛋白及mRNA表达总体呈下调趋势(P＜0.05),与对照组比较,各药物组E-cad蛋白及mRNA表达下调幅度较小,且48 h比24 h明显.而Vimentin蛋白及mRNA表达总体呈上调趋势,与对照组比较,各药物组Vimentin蛋白及mRNA表达上调的幅度较小,且48 h比24 h明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 虎杖苷能抑制TGF-β1诱导的A549细胞EMT过程,并存在时间和剂量依赖性,具有抑制肺纤维化的作用.
虎杖苷、转化生长因子-β1、A549细胞、上皮间质转化、肺纤维化
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R730.2;R394.2;R285.5
国家自然科学基金;浙江省自然科学基金
2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
466-470
