健脾养正消癥方对裸鼠胃癌皮下移植瘤细胞凋亡的影响及自噬机制的实验研究
目的 观察健脾养正消癥方对人胃癌MGC-803细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤抑瘤率的影响及可能的分子机制.方法 取胃癌MGC-803细胞接种于裸鼠皮下,制备裸鼠移植性胃癌模型.32只BALB/c裸鼠按随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和健脾养正消瘕方高、低剂量组,每组8只.阴性对照组给予生理盐水灌胃,阳性对照组给予5-氟尿嘧啶(5-Fu,2.5 mg/kg)灌胃,健脾养正消瘕方高、低剂量组分别以85、43 g/kg灌胃,每天1次,连续10天.观察健脾养正消瘕方对裸鼠皮下移植瘤抑瘤率的影响;采用RT-PCR法观察该复方对移植瘤中Bax、Bcl-2、Fas、Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3基因表达的影响;采用Western Blot法观察该复方对移植瘤中procaspase-3、procaspase-8和procaspase-9、cleaved-PARP、Beclin-1和LC3B蛋白表达的影响.结果 (1)与阴性对照组比较,阳性对照组和健脾养正消癥方高、低剂量组瘤重明显减轻(P＜0.05),健脾养正消瘕方高、低剂量组瘤重均高于阳性对照组(P＜0.05).(2) RT-PCR显示:与阴性对照组比较,阳性对照组和健脾养正消瘕方高、低剂量组Bax表达上调,Bcl-2、Cyclin D1、Cyclin D2和Cyclin D3表达下调(均P＜0.05),阳性对照组及健脾养正消瘕方高剂量组Fas表达上调(P＜0.05);与阳性对照组比较,健脾养正消癥方高、低剂量组Fas、Bax表达均下调,Bcl-2、Cyclin D2和Cyclin D3表达上调(均P＜0.05),健脾养正消瘕方高剂量组Cyclin D1下调,低剂量组Cyclin D1上调(均P＜0.05).(3) Western blot显示:与阴性对照组比较,健脾养正消癥方高、低剂量组procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白表达下调,cleaved-PARP、Beclin-1、LC3BⅡ蛋白表达上调(均P＜0.05);阳性对照组procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9和LC3BⅡ蛋白表达下调,cleaved-PARP、Beclin-1和LC3B Ⅰ蛋白表达上调(均P＜0.05).结论 健脾养正消瘕方对胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤有显著的抑制作用,其作用可能与其激活凋亡、自噬相关因子有关.
健脾养正消癥方、胃癌MGC-803细胞、皮下移植瘤、凋亡、自噬
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R735.7;R329.24;R979.1
国家中医药管理局项目;国家中医药管理局项目;国家自然科学基金;江苏省临床医学科技专项
2015-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1113-1118
