丹参注射液对人血清培养类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响
目的 探讨丹参注射液对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA FLSs)增殖的影响.方法 常规培养良好的RA FLSs,传代时用10％未灭活人血清(健康人血清和RA患者血清)作用24 h后,加入终浓度为0.4 mg/mL丹参注射液,继续培养24h.以10％胎牛血清作对照,光学显微镜观察人血清培养后和丹参注射液作用后的细胞形态变化;采用MTT法分析其增殖变化;流式细胞仪检测其凋亡;提取各组总RNA并逆转录,荧光定量PCR检测Bax mRNA表达.结果 (1)无论是加入健康人血清还是RA患者血清后,细胞均能贴壁生长.相比而言胎牛血清组细胞背景较为干净,而人血清组细胞密度较胎牛血清组高,细胞形态无明显改变.(2)与胎牛血清组比较,MTT增殖实验显示,健康人血清组和RA患者血清组的吸光度(OD)值均明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);加终浓度为0.4 mg/mL丹参注射液后,3组不同来源血清作用的细胞均受到不同程度的抑制(OD值显著降低,P＜0.05),且健康人血清组和RA患者血清组与胎牛血清组比较,OD值显著增加,差异有统计学意义(P＜0.01),健康人血清组与RA患者血清组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).(3)与胎牛血清组比较,RA血清组凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);胎牛血清组和RA患者血清组,经0.4 mg/mL丹参作用后,与相应未加丹参组比较,凋亡率均显著增加,差异有统计学意义(P ＜0.05);FLSs经0.4 mg/mL丹参作用后,与胎牛血清组比较,健康人血清组和RA患者血清组的凋亡率均显著降低,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).(4) FLSs经0.4 mg/mL丹参作用后,RA血清组和胎牛血清组Bax mRNA表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.01);与胎牛血清组比较,健康人血清组及RA患者血清组,Bax mRNA的表达变化明显,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 (1)虽然健康人血清能更好的利于RAFLSs的生长,但对于特定疾病的细胞生物学研究,如无相应疾病患者血清前提下,胎牛血清更能反映真实结果;(2)丹参注射液可通过促进RA FLSs凋亡而抑制其增殖.
丹参注射液、类风湿关节炎、成纤维样滑膜细胞、凋亡
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R28;R31
四川省卫生厅科研项目090141,100151;川北医学院重点实验室开放基金项目KFJJ09-03
2013-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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