美洲商陆抗病毒蛋白在毕赤酵母中的表达及其诱发人神经胶质瘤细胞U251凋亡的研究
目的 研究美洲商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)基因的克隆表达,进而研究其诱发人神经胶质瘤细胞U251凋亡.方法 利用RT-PCR技术克隆PAP基因,构建PAP毕赤酵母表达质粒pPIC-ZaA-PAP并导入毕赤酵母Pichia pastoris CS115.SDS-PAGE检测PAP的分泌表达.采用镍离子亲合层析纯化PAP,并通过单细胞凝胶电泳和MTT检测其抑制人神经胶质瘤细胞U251的生长.结果 分泌表达的PAP融合蛋白分子量约为35/kD,纯化的PAP在体外能诱发人神经胶质瘤细胞U251凋亡.PAP对U251半数抑制浓度(IC50)为81.0μg/mL,通过单细胞凝胶电泳,能看到明显的慧星尾,表明PAP引起了神经胶质瘤细胞基因组的降解.结论 PAP蛋白能抑制神经胶质瘤细胞的生长及诱发人神经胶质瘤细胞U251凋亡.
美洲商陆抗病毒蛋白、毕赤酵母、单细胞凝胶电泳
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R96;O61
河南省科技攻关项目092102310084
2012-02-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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