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清肝活血方及其拆方抗酒精性肝损伤大鼠肝细胞内质网应激性凋亡的作用及机制

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目的 研究中药复方清肝活血方及其拆方抗酒精性肝损伤大鼠肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)性凋亡的作用及机制.方法 利用酒精-玉米油-吡唑复合试剂制备大鼠慢性酒精性肝损伤模型.将造模大鼠随机分为模型组、清肝活血方组、清肝方组及活血方组,另设CCl4对照组和正常对照组,每组10只.造模各组大鼠每天上午以酒精复合试剂灌胃,下午各中药组分别给予清肝活血方9.5 g/(kg·d)、清肝方3.0 g/(kg·d)、活血方6.5 s/(kg·d)灌胃,模型组给予等体积生理盐水灌胃;CCl4组每周1次腹腔注射CCl40.3 mL/kg,正常对照组给予生理盐水灌胃,连续治疗2周.组织病理学观察肝脏病理变化;ELISA法检测血清总同型半胱氨酸(total homocysteine,tHCY)水平;流式细胞术检测肝细胞凋亡率;RTPCR和Westemblot法检测大鼠肝脏ERS凋亡相关因子真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factor 2 alpha,eIF-2αa)、磷酸化eIF-2α(p-eIF-2α)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GPR78)、Caspase-3基因和蛋白表达.结果 与正常对照组比较,模型大鼠出现了典型的慢性酒精性肝损伤病理改变如脂肪变性、炎症甚至纤维化;肝细胞凋亡明显增加,凋亡率达到了正常大鼠的5倍以上,且以早期凋亡为主;血清tHCY水平显著升高;P-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白表达明显增高(P<0.01);GRP78及Caspase-3 mRNA表达量显著增高(P<0.01,P<0.05).与模型组比较,清肝活血方及拆方组大鼠肝损伤及肝细胞凋亡程度明显减轻,血清tHCY水平显著降低,p-eIF-2α、GRP78及Caspase-3蛋白表达明显降低(P<0.01);清肝活血方组GRP78和Caspase-3 mRNA表达明显降低(P<0.01,P<0.05);清肝方组仅GRP78 mRNA表达明显降低(P<0.05).结论 清肝活血方及其拆方可能通过降低血清tHCY水平及肝脏ERS凋亡相关因子的表达抑制酒精性肝损伤动物肝细胞ERS性凋亡.

清肝活血方、拆方、酒精性肝病、内质网应激、细胞凋亡

31

R28;R57

教育部新世纪优秀人才支持计划NCET07-0563;上海市教委重点学科J50305、E3008;上海市教委青年基金07CZ08

2011-08-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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1003-5370

11-2787/R

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