益气活血复方含药血清对人脐静脉内皮细胞TLR4及其下游髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子-6表达的影响
目的 研究益气活血复方含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Toll样受体4(TLR4)及其下游信号转导通路主要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)表达的影响,从mRNA和蛋白水平探讨益气活血复方含药血清防治动脉粥样硬化的机制.方法 选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即正常组、中药高、中、低浓度(1.6、0.8、0.4 g/mL)组,每组5只.各组白兔分别以生理盐水和高、中、低浓度益气活血复方连续灌胃7天.末次灌胃给药2 h后,心脏采血,离心后分离血清.体外培养HUVECs,随机分为6组,即空白对照组、模型组、西药对照组、中药高、中、低浓度组,用LPS刺激后,分剐加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预24 h,收集细胞,用荧光定量PCR方法 和Western blotting法分别测定TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的表达.结果 用LPS刺激HUVECs后,引起TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的高表达(与空白对照组比较,P<0.01),用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、MyD88及TRAF-6 mRNA和蛋白的高表达(与模型组比较,P<0.01,P<0.05).结论 益气活血复方可阻断TLR4高表达,同时阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径,抑制下游NF-κB以及各种相关基因表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一.
中药含药血清、内皮细胞、Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子-6、动脉粥样硬化
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R73;R68
辽宁省教育厅科学技术研究项目20060534
2010-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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