高粱幼叶细胞悬浮系的建立

摘要：

以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究.结果表明:幼叶在MS(Murashige and Skoog) +2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2～3次继代筛选后获得了浅黄色、颗粒状胚性愈伤组织;胚性愈伤组织接种于液体培养基中,于25±1℃、黑暗条件下,经45～60d的悬浮震荡培养建立了高质量的细胞悬浮系,细胞生长曲线呈“S”型,细胞密度可达6.45×105～5.08×106个/mL以上,活细胞率可达72.76％,近圆细胞率可达87.50％;培养基的基本成分、激素种类和水平对悬浮细胞生长状态有很大的影响,相比1/2MS培养基,MS培养基为适宜的培养基,2,4-D对保持细胞系的稳定增殖至关重要,适宜的浓度为1mg/L;培养液中加入0.5mg/L KT或6-BA会造成悬浮液褐化,影响悬浮细胞的生长;最适宜的细胞悬浮培养基为L2培养基(MS+1mg/L 2,4-D,30g/L蔗糖,pH5.8),震荡培养转速为110～120r/min,继代周期为7d,新旧培养基的接种比例为2∶1.

关键词：高粱、细胞悬浮系、活细胞率、近圆细胞率、细胞密度

资助基金：山西省科技厅攻关项目20150311003-2;山西省农业科学院农业科技创新研究课题ZDSYS1506;山西省农业科学院育种基础项目Yyzjc1405

在线出版日期：2018-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：35-40,封2