耐碱GsCHX19基因的克隆及对苜蓿的遗传转化

摘要：

基于实验室前期野生大豆G07256碱胁迫转录组数据,结合生物信息学方法筛选得到响应碱胁迫的cation/H+逆向转运蛋白基因GsCHX19,克隆了GsCHX19基因全长CDS编码序列并将其构建到pCAMBIA330035Su植物超量表达载体中.以肇东紫花苜蓿为受体材料,通过农杆菌介导法将重组的植物表达载体转化其子叶节,用含0.5mg/L草铵膦的筛选培养基进行筛选,获得20株抗性植株.采用PCR方法检测抗性植株中bar基因的表达,获得16株PCR阳性植株.对获得的PCR阳性植株进行RT-PCR及real-timePCR检测,鉴定共获得11株RT-PCR阳性植株,且证明GsCHX19基因在各转基因植株中均有不同程度的表达.结果表明,GsCHX19基因成功转化苜蓿,并且得到表达,该转基因植株将为耐盐碱转基因苜蓿新品种的培育提供重要的试验材料.

关键词：Cation/H+逆向转运蛋白、GsCHX19、野生大豆、苜蓿、遗传转化

资助基金：国家自然科学基金31171578;黑龙江省高校科技创新团队建设计划2011TD055

在线出版日期：2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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