作物叶片蛋白质组提取与酶切方法比较研究

摘要：

蛋白质组样品制备主要涉及蛋白质的提取和酶切处理,是蛋白质组学分析的限制环节之一.为了提高作物叶片蛋白质组样品制备的效率和重复性,系统比较了6种缓冲液(pH8.5 Tris-HCl酚、pH7.0磷酸盐、pH9.0碳酸盐、尿素/硫脲、pH8.0 Tris-HCl、pH4.5醋酸盐)和TCA-丙酮处理对水稻、小麦、大豆和玉米叶片蛋白质提取的影响,同时以小麦叶片总蛋白和牛血清白蛋白为样本,比较了传统方法和微波辅助方法的酶切效率.结果表明,TCA-丙酮处理的小麦和水稻样品采用尿素/硫脲方法能获得较高的蛋白得率,而玉米和大豆样品采用尿素/硫脲直接提取时蛋白质得率更高,同时,微波辅助酶切值得用于蛋白质组样品制备.本研究采用适当的蛋白质提取和酶切方法,有效提高了蛋白质的提取率和鉴定率,可为进一步深入开展作物叶片的蛋白质组学研究提供借鉴.

关键词：蛋白质组、样品制备、蛋白酶切、作物、叶片

资助基金：中国农业科学院科技创新工程作物分子标记技术及其应用科研创新团队

在线出版日期：2016-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：50-56