棉花转基因“喷花法”应用条件优化的研究

摘要：

针对目前众多的棉花转基因方法存在转化过程复杂、成本高、效率较低等问题,实验对转基因方法-“喷花法”进行优化,明确了在棉花育种科研中应用条件,达到快速、高效转化外源基因的目的.实验选用了5个陆地棉品种(系)和2个海岛棉品种为转化受体材料,转化了2个外源基因-抗虫(Bt +CpTⅠ)和增强纤维品质基因(NPTⅡ-GhCAD6),并对转化时等渗液各成分的比例、转化的时间段、温度及湿度条件等因素对转化率的影响进行研究.结果表明,转化效率最高时等渗液各成分的含量:陆地棉为1/2MS+10％蔗糖+0.5g/LMES +0.01mg/L 6-BA+ 200μl/L表面活性剂,pH=6菌株浓度OD600=0.5;海岛棉为1/2MS+15％蔗糖+0.5g/L MES +0.01mg/L 6-BA+ 200μl/L表面活性剂,pH =6菌株浓度OD600=0.5;转化效率最高时转化的时间段为11:00 ～13:30,相应的温度为22～29℃、湿度为70％～85％;转化后的T0代受体材料,首先在田间进行抗生素检测,然后在获得的阳性植株中,转抗虫基因材料用金标BT-CryⅠ Ab/Ac试纸条定性检测,转纤维品质基因材料做PCR电泳检测,经检测最终获得了一批转基因阳性植株.最终建立一种应用在农业育种科研中大批量、高效快速、简易实用的转基因方法.

关键词：棉花、转基因、“喷花法”、等渗液、转化条件

资助基金：新疆兵团青年创新基金项目2010JC26;国家转基因重大专项2011ZX08005-002

在线出版日期：2014-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：31-35