高粱TCP转录因子基因SbTCP14的克隆和表达分析

摘要：

为探究高粱(Sorghum bicolor)TCP转录因子SbTCP14的 表达特征,以高粱'BTx623'为材料,对其进行基因克隆、生物信息学分析、响应胁迫表达及蛋白原核表达研究.结果显示,高粱SbTCP14基因CDS全长为1 185 bp,其蛋白分子量大小为40.09 kDa,编码394个氨基酸,亚细胞定位于细胞核,无跨膜区和信号肽.系统进化分析表明高粱SbTCP14与玉米ZmTCP14的亲缘关系最近.qRT-PCR分析表明,在250 mmol·L-1 NaCl和20％PEG6000处理下,SbTCP14基因表达量呈先升高后降低模式.在300 mmol·L-1甘露醇处理下,SbTCP14基因表达量在24 h内无显著变化.经0.01 mmol·L-1 IAA和1 mmol·L-1 SA处理后,SbTCP14基因表达量呈先升后降趋势.原核表达结果显示,SbTCP14蛋白最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3)菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG浓度为0.8 mmol·L-1.Western blot结果验证原核表达的蛋白为SbTCP14.

关键词：高梁;SbTCP14;基因克隆;生物信息学分析;表达分析

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资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技计划;贵州省高层次留学人才创新创业择优资助项目[201802号]和贵州大学大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2021-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1573-1581