荧光探针检测娃娃菜组织钙离子的条件优化

摘要：

植物体内Ca2+含量不足是引起娃娃菜干烧心病的主要原因之一,为了探究温度对娃娃菜幼苗Ca2+吸收及分布的影响,本研究以娃娃菜幼苗叶片及根系组织为试验材料,将Ca2+荧光探针Fluo-3/AM载入娃娃菜细胞中,并结合激光扫描共聚焦显微镜技术,先优化荧光探针检测娃娃菜叶片及根系胞质游离Ca2+的测定方法,然后应用优化的测定方法研究不同温度对娃娃菜幼苗Ca2+吸收及分布的影响.结果 表明,采用20μmol·L-1的Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM装载,依次进行低温4℃加载90 min、25℃去酯化90 min,可获得较为理想的娃娃菜胞质游离Ca2+染色结果.不同温度处理7d后,高温胁迫下(35℃/20℃,昼/夜)娃娃菜叶片中Ca2+含量与适宜温度下(25℃/18℃,昼/夜)无明显差异,低温胁迫下(10℃/5℃,昼/夜)叶片组织Ca2+含量明显高于适宜温度;根尖组织中Ca2+含量在三个温度处理下无明显差异.该试验方法可用于检测娃娃菜胞质游离Ca2+的变化,为研究娃娃菜胞内钙信号变化及选育抗干烧心品种提供技术基础.

关键词：娃娃菜、Ca2+吸收、荧光探针、温度胁迫

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资助基金：甘肃农业大学学生大学生创新创业计划;中央引导地方科技发展专项资金;甘肃农业大学公招博士科研启动基金;甘肃农业大学盛彤笙科技创新基金

在线出版日期：2021-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：963-968