利用CRISPR-Cas9系统进行水稻OsMADS15基因的定向编辑
CRISPR-Cas9系统的发现和应用为快速、定向的植物基因组编辑、突变体创制和开展植物功能基因组研究提供了新的技术工具.在本研究中,我们利用CRISPR-Cas9系统,对水稻A类MADS-box转录基因OsMADS15进行定点基因组编辑.结果显示,该体系在T0代即获得3个不同的9522Osmads15双等位突变株系:株系9522Osmads15-1等位1在靶点缺失1个碱基A,等位2在靶点缺失3个碱基ACA;株系9522Osmads15-2等位1在靶点缺失5个碱基CAACA,等位2在靶点缺失3个碱基CAA;株系9522Osmads15-3等位1在靶点缺失1个碱基A;等位2发生了大片段的替换.所有株系等位1的突变均造成了开放阅读框移码,导致翻译提前终止;等位2的突变也使氨基酸序列发生不同程度的变化.初步的表型分析显示,9522Osmads15突变体小穗不育外稃变长如叶状,并表现出生殖生长向营养生长的转变;与已报道的中籼3037dep突变体表型不同,除9522Osmads15-2株系外,其他2个株系内稃及生殖器官也有向叶片转换的趋势.qRT-PCR分析显示,3个突变株系的OsMADS15转录本水平显著降低.因此,本研究对OsMADS15基因第一外显子区域的靶点进行了高效的定点编辑,获得的9522Osmads15突变体为进一步开展Os-MADS15调控水稻小穗发育的遗传学和调控网络研究提供了新的遗传材料.
水稻、CRISPR-Cas9、基因组定点编辑、花器官、OsMADS15
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O65;S88
国家自然科学基金面上项目31470397和31671260;上海市科委基础研究重大重点项目14JC1403901.This work was supported by the National Natural Science Foundation of ChinaGrant . 31470397 and 31671260;Key Project on Basic Research from Science and Technology Commission of ShanghaiGrant 14JC1403901
2017-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
969-978
