棉花保卫细胞原生质体的有效分离与活性鉴定

摘要：

模式植物拟南芥保卫细胞原生质体的分离技术已得到应用,然而如何有效分离和纯化棉花保卫细胞原生质体,已成为棉花气孔运动调控机理研究的限制因素.本文探索了一种棉花保卫细胞原生质体分离和活性鉴定的方法.我们选取生长2~3周的棉花幼叶下表皮,利用1.3%纤维素酶和0.03%果胶酶进行一步酶解约1.5 h,先低速15×g离心5 min,再高速105×g离心10 min分离,所获得保卫细胞原生质体的数量和纯度较好.利用膜片钳技术检测所分离得保卫细胞原生质体活性,发现记录的全细胞K+电流稳定性好,光处理明显增加K+的内流,说明所检测原生质体的细胞质膜及其生理活性保持较好.该棉花保卫细胞原生质体分离和鉴定方法的建立,可为研究棉花保卫细胞膜通透性、离子转运以及气孔运动机理提供基础.

关键词：棉花、保卫细胞、原生质体、K+电流

所属期刊栏目：53

分类号：S66;S64

资助基金：国家自然科学基金31670289和31570294;国家转基因生物新品种培育重大专项2016ZX08005-004;河南省基础与前沿技术研究计划142300413225. This work was supported by the National Natural Science Foundation of ChinaGrant . 31670289 and 31570294;Genetically Modified Or-ganisms Breeding Major Projects of ChinaGrant 2016ZX08005-004;Basic and Advanced Technology Research Project of HenanGrant 142300413225

在线出版日期：2017-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：729-735