地黄RgDXR基因的克隆及表达分析

摘要：

本研究采用RT-PCR法对地黄DXR基因进行克隆,并用生物信息学方法分析其功能结构域、系统进化等;将地黄DXR基因克隆到原核表达载体pET-32a上,使用大肠杆菌BL21菌株进行RgDXR蛋白的原核表达及纯化,实时荧光定量PCR方法分析RgDXR在不同组织、不同内生菌诱导下的表达特性.获得的RgDXR基因cDNA全长为1425 bp,编码474个氨基酸.生物信息学分析发现RgDXR基因编码的蛋白质具有典型的DXR功能结构域,属于植物DXR基因家族.系统进化树分析表明,地黄RgDXR与芝麻亲缘关系最近.荧光定量PCR结果显示,栽培品种”北京3号”根中RgDXR表达量最高.内生真菌诱导实验表明,RgDXR基因的转录水平与梓醇等环烯醚萜类物质的含量成正相关.本研究克隆所得的地黄RgDXR基因属于DXR基因家族,推测其可能与地黄中环烯醚萜类物质的生物合成有关.

关键词：地黄、RgDXR基因、生物信息学分析、原核表达、表达分析

所属期刊栏目：53

分类号：R5 ;R69

资助基金：国家自然科学基金81603232;国家”十二五”科技支撑计划2011BAl06802;河南中医学院博士科研基金BSJJ2011-07. This work was supported by the National Natural Science Foundation of ChinaGrant 81603232;National ”Twelfth Five-Year Plan” Science and Technology Support Project of ChinaGrant 2011BAl06802;Doctoral Research Fund of Henan University of Traditional Chinese MedicineGrant BSJJ2011-07

在线出版日期：2017-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：563-571