发状念珠藻过氧化物还原酶NfPrx基因的克隆与表达分析
过氧化物还原酶(peroxiredoxin, Prx)属抗氧化蛋白超家族,为了探究Prx在发状念珠藻抗逆过程中所具有的生物学功能,从发状念珠藻细胞中克隆了NfPrx基因的完整开放阅读框(ORF),并对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据氨基酸序列预测了该蛋白的三维结构,在此基础上构建了基因的融合表达载体并诱导其表达,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfPrx的表达特性。结果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,编码203个氨基酸, NfPrx具有PRX_Typ2cys结构域,属于硫氧还蛋白超基因家族,与点形念珠藻、丝状蓝藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物种的Prx氨基酸序列一致性高达94%以上。NfPrx与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳,证实诱导表达的NfPrx蛋白与预期结果大小一致。qRT-PCR分析结果显示, NfPrx的表达随干旱胁迫程度的增加先增后降, PEG-6000浓度为8%时,表达量达到峰值,根据表达特性,推测过氧化物还原酶可能参与响应发状念珠藻逆境胁迫过程。
发状念珠藻、过氧化物还原酶、基因克隆、表达分析
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S64;Q94
国家自然科学基金31360025、31260023、31360361和31560418。This work was supported by the National Natural Science Foundation of China Grant .31360025,31260023,31360361, and 31560418
2016-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1287-1294
