杨树酚酸糖基转移酶基因PtSGT1的克隆及其酶活性鉴定

摘要：

酚酸类物质在植物抵御病虫害方面发挥着重要作用，并且与木质素、类黄酮以及水杨酸等物质合成密切关联，因此，研究酚酸代谢调节具有重要意义。为了研究杨树中酚酸物质的糖基化代谢修饰，本文以毛白杨为实验材料，采用RT-P C R技术分离克隆了糖基转移酶基因PtSGT1。序列分析表明，该基因编码蛋白中含有次生代谢特征性的保守序列PSPG框。然后构建了其原核表达载体并在细菌中诱导表达，经过提取和纯化获得了PtSGT1重组蛋白。对该重组蛋白进行了广泛的酶活性筛选，对催化产物进行了色谱和质谱鉴定，发现该酶特异性地糖基化修饰酚酸类物质，而对其他类型化合物没有催化活性，证明PtSGT1是参与杨树酚酸类代谢修饰的糖基转移酶。另外，分析了PtSGT1基因在杨树9种不同组织的表达水平，发现该基因在老叶以及老茎中表达水平高，说明该糖基转移酶在体内可能与酚酸等次生代谢物的修饰、解毒、储藏等有关。本工作首次表明杨树体内存在着酚酸代谢物的糖基化修饰酶和修饰途径，为杨树的酚酸代谢调节研究以及病虫害防治奠定了基础。

关键词：杨树、酚酸类代谢、糖基转移酶、基因克隆

所属期刊栏目：52

分类号：Q81;Q5;S965.125

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：957-966