油菜抗逆相关基因FOX拟南芥文库构建

摘要：

利用FOX hunting system技术，结合高通量的Gateway技术，以模式植物拟南芥为载体，建立了一个油菜抗逆相关基因功能研究体系，构建了一个超表达油菜抗逆相关基因的拟南芥文库，并将其命名为油菜-FOX-拟南芥文库。根据拟南芥抗逆信号转导研究基础，筛选出80个拟南芥抗逆相关基因并与油菜基因组信息进行同源性比对，最终获得70条具有完整ORF的EST序列。PCR扩增上述70个候选基因。利用Gateway技术构建35S强启动子驱动的70个候选基因的植物表达文库。农杆菌介导的拟南芥Flower-dip法转化600多株Col-0生态型拟南芥，收获种子约30000粒。PPT筛选和PCR鉴定得到355个转化株，其中328个单株收获到种子。经Mannitol、NaCl和ABA平板培养基上筛选，获得根长不敏感植株68株，根长敏感植株65株。在Mannitol和NaCl平板培养基上筛选到子叶变绿不敏感植株11株。同时在FOX库中发现5株形态表型异常的植株(包括叶片卷曲，植株矮小等)。

关键词：非生物胁迫、FOX hunting system、Gateway、油菜、拟南芥

分类号：Q78;Q943.2;R575

资助基金：国家自然科学基金31470085;31201148

在线出版日期：2015-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1257-1264