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禾谷镰孢菌果胶裂解酶PelA的生物学功能分析

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果胶裂解酶是果胶酶的重要成员之一,能够通过β-消除作用,催化降解(1→4)-α-D-聚半乳糖醛酸.本研究首次鉴定出禾谷镰孢菌中的一个果胶裂解酶PelA,并在体外检测了其生化特性.PelA基因(FGSG_02386)的cDNA被克隆并进行了原核表达,同时构建了单基因敲除突变体.将重组质粒pET-28a(+)-PelA转化蛋白表达菌株大肠杆菌BL21表达目的蛋白,纯化后的蛋白具有果胶裂解酶活性.酶活性测定结果显示,该酶的活性受到外界环境因素如温度、钙离子浓度和pH条件的影响,其最适反应条件为50℃,CaC12浓度0.5 mmol·L-1,pH 8.5.在侵染小麦胚芽鞘时PelA单基因突变体的毒力较野生型菌株并没有出现明显变化.

果胶裂解酶、禾谷镰孢菌、小麦胚芽鞘

50

国家基础研究项目2011CB100702;中国科学院知识创新项目KSCX2-EW-N-06

2014-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共10页

243-252

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