梨果实愈伤组织褐腐病菌侵染过程cDNA-SRAP差异分析
梨果实褐腐病危害果实,可造成果实运输和储藏过程中严重的经济损失.本研究构建了褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织离体系统,对梨褐腐病菌侵染其果实愈伤组织不同时期进行细胞学观察分析,基于cDNA-SRAP技术,分析该过程中差异基因表达,以期分离克隆与梨果实抗病反应过程相关的防卫基因.结果表明:与未侵染的梨果实愈伤组织相比,侵染12～60h过程中梨果实褐腐病菌从表面逐渐深入到内部细胞;30个SRAP引物组合共扩增出457条带,其中差异回收条带数为16条,差异比率为3.5％.最终获得5条差异基因表达条带.核酸序列同源性分析表明,其中1条差异基因片段未搜索到任何同源蛋白,2条差异基因片段经序列比对,序列相似度一致,与苹果属的肉桂醇乙酰脱氢酶(CAD)同源性为96％;其他2条差异基因片段分别与DNA结合蛋白(DBP)和寡肽转运蛋白(OPT)基因序列同源,其同源性为85％和78％,因此暂将这3个基因命名为PbCAD、PbDBP和PbOPT.荧光定量PCR结果表明,PbCAD基因在褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织12和24 h时相对表达量最高,为对照的2.94和2.66倍;PbOPT基因在褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织12～36 h时相对表达量明显升高,为对照的2.17～2.46倍,而其他时期表达量均与对照接近;PbDBP基因表达量在整个侵染时期均与对照接近.因此我们推测PbCAD和PbOPT基因可能为梨褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织响应的相关防卫基因.
梨、愈伤组织、褐腐病菌、cDNA-SRAP
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Q945(植物学)
2012-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
166-172
