DNA未知片段APCR克隆的优化

摘要：

用锚定PCR(APCR)技术对未知的小麦淀粉合成关键酶基因gbss Ⅰ和sbeⅡa启动子序列进行扩增.通过对APCR反应进行优化,获得了gbssⅠ启动子序列(4.1kb)和sbeⅡa启动子序列(3.1kb).结果表明:减少模板加入量(由1μL降低至1/100μL)和增大反应体积(由50μL增到100μL)均可在一定程度上减少非特异的结果出现;升高变性温度(由94℃提高到98℃)和延伸温度(由55℃提高到72℃)并延长延伸时间则能有效地消除APCR中的非特异性条带.

关键词：APCR、DNA未知片段、小麦、启动子序列

所属期刊栏目：41

分类号：Q94(植物学)

资助基金：河南省高校杰出科研创新人才工程项目0121000700

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：509-512