藏药二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制研究

摘要：

目的 研究藏药二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,初步探讨相关抑菌机制.方法 采用琼脂平板打孔法,测定二十五味鬼臼丸(50、100,200mg·mL-1)对金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小.通过微量肉汤稀释法,测定最小抑菌浓度(MIC).调整肉汤培养基中的二十五味鬼臼丸浓度为0.5MIC、1.0MIC和2.0MIC,分别加入1.0×108 CFU·mL-1菌悬液,以不含药液而含菌量相同的培养基作为对照组,在37℃、120r·min-1恒温培养箱中振荡培养,每小时取样,用紫外可见分光光度计在600 nm处测定吸光度(A600)值,绘制细菌的生长曲线;每2小时取样,离心取上清液,试剂盒法测定碱性磷酸酶(AKP)活性;每小时取样,离心取上清液,用紫外可见分光光度计在260 nm处测定A260值,以A260值表示DNA/RNA大分子相对量;每小时取样,离心取上清液,加入考马斯亮蓝G250溶液,于595 nm处测定A595值,检测胞外可溶性蛋白含量;培养8 h后,离心留沉淀,进行SDS-PAGE电泳,检测菌体蛋白含量.结果 二十五味鬼臼丸50、100、200 mg·mL-1对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为(12.33±0.75)、(16.33±0.41)、(19.17±0.68)mm;对金黄色葡萄球菌的MIC为100 mg·mL-1;与对照组相比,二十五味鬼臼丸组的金黄色葡萄球菌生长显著减缓(P＜0.05),胞外的AKP活性显著升高(P＜0.05),胞外DNA/RNA大分子相对量显著升高(P＜0.01),胞外可溶性蛋白含量显著升高(P＜0.01),菌体总蛋白表达量明显减少.结论 二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,其抗菌作用可能与致细菌细胞壁、细胞膜结构破损,且对菌体蛋白具有一定抑制作用有关.

关键词：二十五味鬼臼丸、金黄色葡萄球菌、最小抑菌浓度、碱性磷酸酶、可溶性蛋白

所属期刊栏目：46

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;西藏自治区科技厅中央引导地方科技

在线出版日期：2023-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：78-84