以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏体外评价方法的确定和验证

摘要：

目的 确定并验证以细胞表面标志物CD54作为评价指标的光致敏体外评价方法.方法 将THP-1细胞与多种光致敏剂、光刺激剂、皮肤致敏剂、皮肤刺激剂和阴性受试物分别孵育,在光照射或避光处理后,用流式细胞仪测定细胞表面标志物CD54和CD86的表达水平并统计分析,进一步确定具体的评价指标,并对该方法的准确性、特异性、灵敏度、重复性进行验证.结果 19种光致敏剂中有15种引起照射组THP-1细胞表达CD54的平均荧光强度(MFI)较非照射组显著增加(P＜0.05、0.01),且照射组细胞表达CD54的相对荧光强度(RFI)值均在1.5以上.光刺激剂经光照射后也可引起细胞表达CD54的MFI显著增加(P＜0.01),但经过预照射处理后,CD54的表达水平较直接照射组显著下降(P＜0.01).未经光照射条件下,皮肤致敏剂即可引起THP-1细胞表达CD54和CD86的MFI比对照组显著增加(P＜0.01),光照后CD54的表达反而略有下降.在光照和避光条件下,皮肤刺激剂、阴性受试物(乳酸)均未引起细胞表达CD54或CD86的显著性变化.以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法检测光致敏剂的准确性、特异性和灵敏度分别是85.2％、100％和78.9％,具有良好的重复性.结论 确定了THP-1细胞光致敏评价方法的细胞表面标志物评价指标为CD54,判定标准为:(1)光照后THP-1细胞表达CD54的MFI较照射前显著性增加;(2)光照后THP-1细胞表达CD54的RFI≥1.5;(3)当上述条件均满足时,对受试物进行预照射处理,结果仍然满足前2条标准.

关键词：光致敏;THP-1细胞;CD54;CD86;平均荧光强度;相对荧光强度;方法学验证

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分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家重大新药创制科技重大专项2018ZX09201017

在线出版日期：2022-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：20-29