以细胞因子为研究指标的光致敏体外评价方法的建立

摘要：

目的 研究和建立以细胞因子水平变化作为评价指标的光致敏体外评价方法.方法 THP-1细胞分别与光致敏剂6-甲基香豆素(6-MC)和对氨基苯甲酸(PABA)、光致敏剂兼光刺激剂硫氯酚(bithionol)、光致敏兼皮肤致敏剂对苯二胺(PPD)和二苯甲酮(BP)、单纯皮肤致敏剂盐酸双氯苯双胍己烷(CHD)和二硝基氯苯(DNCB)、光刺激剂蒽(anthracene)和吖啶(acridine)、皮肤刺激剂月桂基磺酸钠(SDS)、阴性对照乳酸(LA)孵育24 h,与相应溶剂孵育作为对照组,经光照射(1.7 mW·cm-2,50 min)或避光处理后,细胞换液放入培养箱内继续培养5h.光刺激剂需在正式光照射前进行预照射(在SOL 500人工太阳照射装置中照射30 min,然后避光放置15 min)处理.采用Luminex分析仪及多因子检测试剂盒分别检测细胞因子白细胞介素(IL)-12/P40、IL-12/P70、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8、IL-18、IL-4和IL-13水平的改变,确定光致敏相关特异性细胞因子,建立相应的光致敏体外评价方法.结果 光致敏剂与THP-1细胞孵育并经光照后,与未照射组比较,细胞裂解液+上清液中IL-8和TNF-α的含量均显著增加(P＜0.01),其中IL-8的增加幅度最大,光致敏剂6-MC、PABA、PPD和硫氯酚照射与未照射组的IL-8水平比值均大于10,TNF-α水平比值均大于1.5.光刺激剂吖啶和蒽细胞模型经过光直接照射后,IL-8水平是未照射组的10倍以上,TNF-α水平是未照射组的1.5倍以上;经过预照射处理后,其照射组与未照射组IL-8比值均下降到10以下,TNF-α比值均下降到1.5以下.皮肤致敏剂DNCB和CHD、皮肤刺激剂SDS、阴性对照LA和对照组,光照射与未照射组IL-8比值均小于10,TNF-α比值均小于1.5.结论 在THP-1细胞模型中,IL-8和TNF-α对于评价化合物光致敏性具有较好的特异性和灵敏度,IL-8更优.

关键词：光致敏;体外评价方法;THP-1细胞;细胞因子;白细胞介素-8;肿瘤坏死因子-α

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分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家重大新药创制科技重大专项2018ZX09201017

在线出版日期：2022-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1-9