地塞米松提高TRAIL基因修饰脐带间充质干细胞对急性T淋巴细胞白血病细胞杀伤作用及机制研究

摘要：

目的 构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因修饰的脐带间充质干细胞(TRAIL-MSCs),并检测其联合地塞米松(DEX)对急性T淋巴细胞白血病细胞系(Jurkat)的影响.方法 通过慢病毒载体将SPD-TRAIL基因转染脐带间充质干细胞(UC-MSCs)构建TRAIL-MSCs,使其能够表达十二聚体TRAIL蛋白(dTRAIL).通过CCK-8法、流式细胞术检测 UC-MSCs、TRAIL-MSCs、DEX(200 μmol/L)、DEX(200 μmol/L)+UC-MSCs 和 DEX(200 μmol/L)+TRAIL-MSCs对Jurkat细胞增殖、凋亡的影响;显微镜光镜下观察细胞形态及密度;通过实时荧光定量PCR及Western blotting法检测各组Jurkat细胞表面死亡受体DR4、DR5 mRNA和蛋白表达水平.结果 CCK-8结果显示,各处理组均可以抑制Jurkat细胞的增殖,与对照组比较有显著性差异(P＜0.01);同时,DEX可以提高TRAIL-MSCs(抑制率约20％)对Jurkat细胞的增殖抑制作用,抑制率提高至60％,与TRAIL-MSCs组比较差异显著(P＜0.01).显微镜观察结果发现,DEX与TRAIL-MSCs联合组对肿瘤细胞Jurkat的杀伤作用最明显;流式细胞术结果显示,TRAIL-MSCs对Jurkat细胞有促进凋亡的作用,凋亡率达10％,单独使用DEX后,凋亡率约20％,与对照组比较差异显著(P＜0.01);DEX联合TRAIL-MSCs作用于Jurkat细胞48 h后,细胞凋亡率为38％,较TRAIL-MSCs组显著提高(P＜0.01).TRAIL-MSCs组DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较对照组显著降低(P＜0.01),DEX组DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较对照组显著升高(P＜0.01),DEX与TRAIL-MSCs联合作用后,DR4、DR5的mRNA、蛋白水平较DEX组显著降低(P＜0.01).结论 DEX可以提高肿瘤细胞Jurkat对TRAIL-MSCs的敏感性,增强TRAIL-MSCs对肿瘤细胞的杀伤作用,可能与提高DR4、DR5表达有关.

关键词：脐带间充质干细胞;急性T淋巴白血病;地塞米松;肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4/5;联合治疗

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分类号：R965(药理学)

资助基金：北京市科技计划课题Z211100002521006

在线出版日期：2021-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2074-2080