10.7501/j.issn.1674-6376.2018.03.010
基于实时细胞分析技术评价注射用益气复脉(冻干)类过敏反应
目的 建立中药注射剂体外类过敏反应评价方法,快速评价不同批次注射用益气复脉(冻干)类过敏反应表现.方法 体外培养嗜碱性白血病细胞株RBL-2H3细胞,选择Compound 48/80为阳性药,采用实时细胞分析(real-time cell analysis,RTCA)系统检测药物干预后引起的细胞指数(CI)值变化,并利用甲苯胺蓝、鬼笔环肽染色观察细胞形态、骨架变化,以及检测组胺和β-已糖苷酶释放量验证RBL-2H3细胞的脱颗粒情况.选择20个批次的注射用益气复脉(冻干,100 μg/mL)作用于RBL-2H3细胞,进行基于RTCA技术的类过敏反应评价.结果 阳性药Compound 48/80(20 μg/mL)能够使RBL-2H3细胞的CI值在加药后30 min内呈先快速上升后下降趋势;形态学研究发现,Compound 48/80使细胞形态和细胞骨架均发生明显改变,发生明显的脱颗粒现象;组胺和β-己糖苷酶释放实验进一步证实Compound 48/80导致炎症介质的释放,引起了明显的脱颗粒现象;提示RTCA系统可以用于快速敏感的评价RBL-2H3细胞脱颗粒.不同批次的注射用益气复脉(冻干)对RBL-2H3细胞CI值无明显影响,提示所选批次为合格批次,无类过敏反应现象的发生.结论 建立了一套基于RTCA系统的类过敏反应体外快速评价技术,可用于注射用益气复脉(冻干)等中药注射剂类过敏反应的体外快速评价.
实时细胞分析(RTCA)、Compound 48/80、注射用益气复脉(冻干)、类过敏反应、RBL-2H3细胞、脱颗粒
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R962.2(药理学)
2018-06-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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