抗苗勒激素及生长分化因子-9对环磷酰胺体外降低大鼠卵巢储备力机制的研究

摘要：

目的 研究抗苗勒激素(AMH)和生长分化因子-9(GDF-9)对环磷酰胺(Cy)降低卵巢储备力机制中的作用.方法 成年雌性SD大鼠25只,取双侧卵巢组织,并切制成500μm厚的卵巢片,将卵巢片分为7组:空白组、Cy组、Cy+卵泡刺激素(FSH)组、Cy+AMH组、Cy+GDF-9组、Cy+FSH+AMH组、Cy+FSH+GDF-9组,放入含DMEM-F12培养液的培养皿中分别培养2d或4d.除空白组外,其余各组于培养液中分别添加Cy 100 ng/mL、FSH 10 mIU/mL、AMH 100ng/mL、GDF-9 100 ng/mL.利用双抗体夹心酶联免疫吸附技术(ELISA)检测雌二醇(E2)、抑制素B(INHB)的量；光镜下计数始基卵泡(PMF)及闭锁卵泡；运用DNA缺口原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况.结果 ①与空白组相比,Cy组PMF数目明显降低,闭锁卵泡明显增多；Cy+AMH组及Cy+ FSH+ AMH组PMF数目明显多于除空白组之外的其他各组.各组培养4d较培养2d始基卵泡数目明显降低,闭锁卵泡数目明显增多.②与空白组相比,Cy组培养2d和4d时E2及INHB水平明显降低；与Cy组相比,培养2d和4d时Cy+FSH组、Cy+ GDF-9组及Cy+ FSH+ GDF-9组E2、INHB明显升高.与Cy组相比,培养2d和4d时Cy+AMH组及Cy+ FSH+ AMH组E2明显升高.培养4d时Cy+AMH组、Cy+FSH+AMH组INHB水平明显升高.③Cy组与空白组比较,凋亡细胞明显增多；Cy+FSH组、Cy+GDF-9组与Cy组相比,凋亡细胞的数量并没有显著减少.Cy+AMH组、Cy+FSH+AMH组与Cy组相比凋亡细胞的数量显著减少.结论 Cy可加速PMF的募集与耗竭,从而使卵巢储备力降低乃至衰竭.FSH及GDF-9可加速PMF的募集与发育,使更多的PMF进入生长卵泡阶段而受到Cy细胞毒的损害,以致PMF库存逐渐耗竭；AMH可抑制PMF的募集与发育,从而减缓Cy对PMF的加速募集与耗竭,起到保护卵巢储备力的作用.

关键词：环磷酰胺、卵巢储备力、GDF-9、抗苗勒激素

所属期刊栏目：36

分类号：R965.3(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30801479

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：335-340