大黄素通过减少DNMTs的表达对胰腺癌细胞抑癌基因ppENK发挥去甲基化作用研究

摘要：

目的 研究大黄素对胰腺癌细胞Panc1 DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)的影响,及其对抑癌基因前脑啡肽原(pre-proenkephalin,ppENK)启动子区 CpG 岛的去甲基化作用,探讨大黄素是否可通过降低 DNMTs的表达逆转ppENK的甲基化状态.方法 CCK-8 检测不同浓度大黄素对Panc1 细胞生长的影响,探索最佳用药浓度,重亚硫酸盐测序PCR(bisulfite genomic sequencing PCR,BSP)检测不同浓度大黄素对ppENK基因甲基化状态的影响,PCR和Western Blot检测ppENK及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a的mRNA和蛋白表达情况.结果 大黄素以时间梯度和浓度梯度依赖性抑制Panc1 细胞生长,其半数最大抑制浓渡(half maximal inhibitory concentration,IC50)约为 40μmol/L,大黄素可使ppENK甲基化状态减弱,非甲基化状态增强;可减弱DNMTs的mRNA和蛋白表达,增强ppENK mRNA和蛋白表达.结论 大黄素可不同程度地使Panc1 ppENK抑癌基因去甲基化,使抑癌基因重新表达.大黄素抑制胰腺癌细胞生长和其去甲基化作用有关,推测大黄素发挥去甲基化作用和其抑制甲基转移酶表达相关.

关键词：大黄素、胰腺癌、去甲基化、DNA甲基转移酶、重亚硫酸盐测序PCR

所属期刊栏目：61

分类号：R733(肿瘤学)

资助基金：浙江省基础公益研究计划项目LQ20H160059

在线出版日期：2023-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：7-10