circ_ACAP2对胃癌细胞BGC-823增殖凋亡的影响及作用机制
目的 分析环状RNA-ACAP2(circular RNA-ACAP2,circ_ACAP2)对胃癌细胞株BGC-823增殖凋亡的影响及作用机制.方法 将体外培养的细胞分为si-NC组[不做处理的人胃上皮细胞(human gastric epithelial cells,GES-1)],si-circ_ACAP2(circ_ACAP2干扰的BGC-823细胞)、miR-NC组(转染miR-488-3p mimics)的阴性对照)、miR-488-3p组(转染miR-204-5p mimics)、si-circ_ACAP2+anti-miR-NC组(转染miR-488-3p inhibitor阴性对照),si-circ_ACAP2+anti-miR-488-3p组(转染miR-488-3p inhibitor),采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测GES-1细胞、胃癌细胞(BGC-823)中circ_ACAP2、微小RNA-488-3p(miR-488-3p)、肌成束蛋白(fascin-1,FSCN1)的表达量,构建抑制circ_ACAP2表达的BGC-823细胞,采用四甲基偶氮唑盐(Tetramethylazo salt,MTT)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、p21、Bcl-2相关性蛋白X(Bcl-2-correlation protein X,Bax)表达情况.结果 与GES-1组相比,BGC-823细胞中circ_ACAP、FSCN1表达水平升高,miR-488-3p表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与si-NC组相比,si-circ_ACAP2组circ_ACAP2表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05),表明抑制circ_ACAP2表达的BGC-823细胞株构建成功.与si-NC组相比,si-circ_ACAP2组CyclinD1、OD值、Bcl-2降低,p21、Bax及凋亡率升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).与miR-NC组相比,miR-488-3p组miR-488-3p表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明miR-488-3p过表达的BGC-823细胞株构建成功.与miR-NC组相比,miR-488-3p组CyclinD1、OD值、Bcl-2降低,p21、Bax、凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05).双萤光素酶报告试验显示,与miR-NC组相比,过表达miR-488-3p可使WT-circ_ACAP2荧光素酶活性降低(P<0.05),对MUT-circ_ACAP2荧光素酶活性影响较小(P>0.05).与si-NC组相比,抑制circ_ACAP2表达可使BGC-823细胞中miR-488-3p表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与si-circ_ACAP2+anti-miR-NC组相比,si-circ_ACAP2+anti-miR-488-3p组CyclinD1、OD值、Bcl-2升高,p21、Bax及凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 干扰circ_ACAP2表达可通过调控miR-488-3p/FSCN1表达,抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡.
胃癌、circ_ACAP2、miR-488-3p、FSCN1
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R735.2(肿瘤学)
浙江省卫生健康科技计划项目;台州市农业科技计划项目
2022-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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