半巢式反转录实时荧光PCR检测马铃薯黑环斑病毒

摘要：

本研究根据基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了3条巢式PCR引物和1条TaqMAN荧光探针,建立了半巢式反转录实时荧光PCR检测PBRSV的新方法.该方法采用E.Z.N.A TM快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR和TaqMAN探针检测技术.第二步半巢式反转录实时荧光PCR既是对第一步信号的进一步放大,也是对第一步PCR产物的确认,因此,检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高.实验结果表明,该方法检测灵敏度可达300fg/μL植物总RNA.

关键词：马铃薯黑环斑病毒、半巢式反转录实时荧光PCR、检测

所属期刊栏目：23

分类号：S432.4;Q93-331(病虫害及其防治)

资助基金：山东检验检疫局课题"马铃薯重要病毒类病害实时荧光PER检测技术研究"SK13-2004

在线出版日期：2010-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：24-26