甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

摘要：

为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus,MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法.基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化.结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65 μmol·L-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍.以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7.实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测.

关键词：甜瓜黄斑病毒、SYBR Green Ⅰ、实时荧光定量PCR、病毒检测

所属期刊栏目：53

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：山东省农业重大应用技术创新项目;山东省重大科技创新工程;山东省自然科学基金

在线出版日期：2023-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：119-125