生姜腐皮镰刀菌的分离鉴定及PCR快速检测方法构建

摘要：

由腐皮镰刀菌(Fusarium solani)引起的生姜枯萎病是一种毁灭性真菌土传病害,其病原菌的快速高效检测,有助于枯萎病的早期诊断及预警.通过回接试验、形态学观测以及系统进化树分析,对湖北生姜产区分离的菌株进行鉴定,获得生姜腐皮镰刀菌(F.solani).基于镰刀菌属通用引物TEF-1αF/TEF-1αR基因序列,以腐皮镰刀菌基因组DNA为模板进行扩增测序,根据序列信息设计筛选出一对腐皮镰刀菌特异性引物,构建了基于普通PCR的快速高效分子检测方法,并对接种过病菌的生姜植株和土壤进行检测验证.通过病原菌的菌落形态、孢子显微结构观察、真菌通用引物ITS1/ITS4鉴定和致病性测定,确定引起生姜枯萎病的病原菌为腐皮镰刀菌(F.solani).用设计的特异性引物F8/R8进行PCR,特异扩增获得约381 bp的目标条带,检测灵敏度为454 pg·μL-1,利用该引物对带菌生姜幼苗和土壤进行检测验证,证实可从发病生姜幼苗和带菌土壤中特异性检测到腐皮镰刀菌(F.solani).本研究明确了引起湖北生姜枯萎病的病原菌为腐皮镰刀菌(F.solani),并建立了 PCR快速检测方法.该检测方法简便、灵敏、高效,可用于生姜枯萎病的早期诊断与预防.

关键词：生姜、枯萎病、腐皮镰刀菌、PCR检测

所属期刊栏目：52

分类号：S436.33(病虫害及其防治)

资助基金：湖北省重点研发项目;中央引导地方专项项目;重庆调味品产业体系重大专项项目;重庆英才计划

在线出版日期：2022-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：681-690