本生烟病程相关蛋白PR-10的原核表达及抗血清制备

摘要：

病程相关蛋白(Pathogenesis-related proteins,PRs)是植物受生物或非生物胁迫后诱导并积累的一类蛋白质,具有抗病抗逆的多种功能.为检测本生烟病程相关蛋白10(Nicotiana benthamiana Pathogenesis-related protein 10,NbPR10)的表达,制备其抗血清,并用以探究其可能的特性和功能.将已有的NbPR10基因构建到原核表达载体pGEX-KG中获得重组质粒pGEXKG-NbPR10,转化大肠杆菌BL21(DE3),经0.2 mM IPTG诱导表达分子量约44 kDa的融合蛋白(含GST标签),用GST亲和柱纯化获得纯化的融合蛋白.以纯化的融合蛋白为抗原免疫家兔制备NbPR10蛋白的抗血清,经Westernblot测定抗血清效价达1∶10000,能至多检测到稀释比例为1∶320的转基因本生烟叶片中的PR10蛋白或1 ng原核表达的蛋白,且能检测到本生烟根和茎中的PR10蛋白,证明PR10在本生烟根和茎中表达量较在叶部高,为进一步研究NbPR10蛋白的功能提供参考.

关键词：病程相关蛋白、PR-10、原核表达、抗血清制备

所属期刊栏目：47

分类号：S432.1(病虫害及其防治)

资助基金：现代农业产业技术体系;国家自然科学基金

在线出版日期：2017-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：505-510