甘薯潜隐病毒单克隆抗体的制备及初步鉴定

摘要：

以原核表达的甘薯潜隐病毒(SPLV)的外壳蛋白(CP)为抗原免疫小鼠,经过细胞融合和亚克隆,筛选出2株稳定分泌抗SPLV CP的单克隆抗体杂交瘤细胞株(5B11-2和5G8-2),并分别制备了单克隆抗体腹水.间接ELISA结果表明,用SPLV CP包被酶联板,5B11-2和5G8-2单克隆抗体的效价均为1∶512 000;用感染SPLV的甘薯叶片汁液包被酶联板,2株单克隆抗体的效价均为1∶6400.抗体类型及亚类鉴定结果表明,2株单克隆抗体均为IgG1、κ轻链.Western blot分析表明,2株单抗均能与SPLV CP和感染SPLV的甘薯叶片汁液有特异性反应.利用单克隆抗体建立的间接抗原包被ELISA(ACP-ELISA)检测SPLV方法,病叶1∶3840倍稀释仍能检测到病毒.血清学和RT-PCR检测结果表明,制备的单克隆抗体可用于田间甘薯样品的检测.

关键词：甘薯潜隐病毒、单克隆抗体、抗原包被ELISA、RT-PCR

所属期刊栏目：47

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金：国家甘薯产业技术体系项目CARS-11-B-07

在线出版日期：2017-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：240-245