玉米圆斑病病原的快速检测
玉米生平脐蠕孢菌(Bipolaris zeicola)是引起玉米圆斑病的病原菌.本研究通过对玉米生平脐蠕孢菌及其近似种的EF-1α基因(elongation factor 1α)部分序列进行比对,设计出玉米生平脐蠕孢菌的特异性引物Y-EF-F和Y-EF-R,利用该引物可以从B.zeicola中扩增出137 bp的特异片段,而其余的17个参试菌株扩增结果为阴性.灵敏度实验表明该对引物可以检测到目标DNA的浓度为1 pg·μL-1.用B.zeicola接种玉米叶片、苞叶以及玉米粒,然后以接种发病的病组织DNA为模板,利用引物Y-EF-F和Y-EF-R进行PCR扩增,可以扩增出137 bp的特异性条带,而健康玉米组织DNA中未能扩增出任何条带.用B.zeicola孢子悬浮液接种大田玉米叶片,接种第3d可以检测到未发病组织中有B.zeicola病原菌,第5d可以看到明显的病斑.研究结果表明该方法可用于快速、准确和灵敏地检测玉米组织中的潜伏期玉米生平脐蠕孢菌,为玉米圆斑病的快速检测,进而及早采取防治措施提供积极的指导.
玉米生平脐蠕孢、EF-1α序列、特异性引物、PCR检测
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S43;TQ4
河南省高校科技创新人才支持计划13HASTIT007;国家自然科学基金31171804,30970016
2017-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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