番茄斑萎病毒运动蛋白NSm的原核表达及抗体制备

摘要：

将番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)运动蛋白NSm基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,利用大肠杆菌系统表达NSm蛋白,以Ni2+-NTA agarose亲和柱纯化该蛋白与His组氨酸的融合蛋白,免疫家兔制备融合蛋白多克隆抗体.Western blot检测显示,该抗体与NSm重组蛋白以及普通烟病叶中的NSm蛋白具有特异性反应.采用该抗体对TSWV感染的普通烟叶片低温超薄切片进行免疫胶体金标记,透射电镜观察发现特异性金颗粒主要定位在病叶细胞的胞间连丝中,而健康烟草叶片组织中没有金颗粒特异性标记.结果表明,该抗体可用于研究NSm在细胞中的定位.

关键词：番茄斑萎病毒、NSm蛋白、多克隆抗体、免疫胶体金标记

所属期刊栏目：45

分类号：S432.41(病虫害及其防治)

资助基金："973"计划前期研究专项2010CB134501;国家"211工程"CERS资助项目CERS-1-29

在线出版日期：2016-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：592-597