啤酒花潜隐类病毒RNA提取方法及检测技术的研究

摘要：

本研究采用纳米磁珠提取法(Magnetic Nanoparticles,MNP)、改良的LiC1沉淀法、CTAB法、TRIzol法和RNeasy Plant Mini Kit 5种方法提取感染啤酒花潜隐类病毒(Hop latent viroid,HLVd)的啤酒花叶片总RNA,结果显示LiC1沉淀法、CTAB法和MNP法提取的RNA的质量较好,而MNP法具有提取时间短、操作简便,环境友好和批量提取的优势,适用于啤酒花潜隐类病毒RNA的快速提取.体外转录制备HLVd RNA标准品,利用实时荧光定量RT-PCR绘制标准曲线,并对其特异性、灵敏度进行评估.应用纳米磁珠提取啤酒花总RNA,结合实时荧光RT-PCR技术,建立了HLVd的快速、高效的MNP-RT-qPCR定量检测方法.

关键词：类病毒、提取方法、实时荧光定量RT-PCR

所属期刊栏目：45

分类号：S432(病虫害及其防治)

资助基金：公益性行业质检科研专项201110035;国家973课题2011CB932800;质检总局课题2013IK267

在线出版日期：2015-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：288-296